蓮子中黃曲霉毒素B1，B2，.G1，G2檢測方案

《中國藥典》對部分中藥材中AFB1的*規定為5µg/kg,黃曲霉毒素總*為10µg/kg。

目前來講，黃曲霉毒素AFT的檢測方法有液相色譜法(HPLC)，酶聯免疫檢測法等。液相色譜法可以的檢測中藥材中黃曲霉毒素的微小含量。而使用黃曲霉毒素 ELISA試劑盒則能夠快速而準確的分析樣品中黃曲霉毒素殘留。

泰樂祺科技作為國內專業從事霉菌毒素檢測技術與產品服務的供應商，泰樂祺檢測應用實驗室重點關注食品安全事件尤其是涉及霉菌毒素安全等問題，針對上述情況,提出了以下解決方案。 

免疫親和柱＋KRC光化學柱后衍生法

1. 簡介

PriboFast黃曲霉毒素B+G免疫親和柱（編號IAC-010-3）可選擇性吸附樣品液中的毒素，從而對毒素樣品起到非常針對性的純化作用，然后用HPLC/FLD＋KRC柱后衍生系統可以有效的測定黃曲霉毒素 B1、B2、G1、G2、濃度，提高檢測的準確性和靈敏度。

2. 免疫親和柱/KRC衍生法特點：

• 采用高特異性的抗體。

• 柱容量高、柱體積大，穩定的純化效率； 

• 柱內膠含量高，保證穩定的回收率；

• 符合國內外*

• 純化后直接用于ELISA 法，液相色譜法，熒光光度法等。

• 適用于各種復雜基質樣品處理
• 衍生化操作方便，光化學衍生化無需使用衍生試劑（通常電化學柱后衍生均需要使用衍生試劑，分析成本高，操作麻煩，儀器故障率較高）。
• 回收率高，達到90％以上

3. 免疫親和柱法操作步驟簡介：

1）樣品處理

•準確稱取25g粉狀樣品，溶于125ml甲醇/水（70/30）中；

.加入5.0g氯化鈉以均質器高速攪拌，提取2分鐘；

.4000r/min離心5min或用槽紋濾紙過濾；

.取15mL濾液并加入30mL水稀釋，用玻璃微纖維濾紙過濾；

.取稀釋后液體待測；

.將免疫親和柱連接于20.0mL玻璃注射器下。準確移取15.0mL樣品提取液注入玻璃注射器；

.將空氣壓力泵與玻璃注射器連接，調節壓力使溶液以約6mL/min流速緩慢通過免疫親和柱，直至2~3mL空氣通過柱體；

.以10.0mL水淋洗柱子2次，棄去全部流出液，并使2mL~3mL空氣通過柱體；

.準確加入1.0mL色譜級甲醇洗脫，流速為1 mL/min ~2mL/min，收集全部洗脫液于玻璃試管中，供檢測用。

•2）測定：HPLC直接進樣，經黃曲霉毒素色譜柱、KRC光化學柱后衍生化后熒光檢測器直接記錄并計算出黃曲霉毒素B1B2G1G2濃度；

Pribofast KRC 柱后衍生器和 HPLC參數（符合GB23212-2008）

PriboFast KRC－25 柱后光化學衍生器         紫外燈波長：254 nm
HPLC-色譜柱 ：黃曲霉毒素色譜柱   150 x 4.6 mm; C-18
流  動  相  ：甲醇-水  45:55
流      量  ： 1.0 mL/min                          

柱      溫  ： 35 °C
進 樣 體 積 ： 20μL
熒光檢測器  ： λ-激發波長：365nm           λ-發射波長：455 nm

液相色譜儀檢測配置；

液相色譜儀帶有熒光檢測器；
Pribofast KRC－25 柱后光化學衍生裝置，配有納米燈管254nm，25米FTFE線圈。
黃曲霉毒素色譜柱 C18 150 x 4.6 mm