黃曲霉毒素分析方法匯總

一、多功能凈化柱＋KRC光化學柱后衍生法

1 簡介

多功能凈化柱是由多種固相復合填料不僅包括大分子物質，更重要的是含有多種活性親脂性（非極性）和帶電（極性）物質，用來吸附各種酯類，葉黃素，化學物質，碳水化合物和蛋白質等干擾物。多功能凈化柱＋KRC衍生法就是利用PRIBOLAB公司的Pribofast 226/260多功能凈化柱可以將AFT B1、B2、G1、G2很好的分離出來，然后用HPLC/FLD＋KRC柱后衍生系統可以有效的測定AFT B1、B2、G1、G2含量。

2 多功能凈化柱特點：

2.1 多功能凈化柱可以簡化樣品提取、凈化步驟，無需清洗和洗提。

2.2 可以實現多種毒素檢測，有效降低檢測成本；

2.3 HPLC＋FLD+KRC衍生化，可以有效提高檢測靈敏度，實現較低的檢測限(AFT B1 0.05ppb)；
2.4 光化學衍生操作簡便，無需使用衍生試劑（通常電化學柱后衍生均需要使用衍生試劑，分析成本高，操作麻煩，儀器故障率較高）；
2.5 一步法凈化，回收率高達90％左右。

2.6 廣泛適用于各類農產品：谷物、淀粉、動物飼料、食品、堅果、棉籽等。

3 多功能凈化柱/KRC衍生法操作步驟簡介：

3.1 提取樣品：研磨粉碎、稱重25g樣品；用乙腈/水（84/16 V/V）混合樣品，

高速均質 1 分鐘。
3.2 過濾：將提取的樣品定量濾紙過濾，收集濾液；

3.3 取4－6ml濾液快速通過 多功能凈化柱PribofastM226 或Pribofast M260

3.4 收集過柱溶液，直接用于HPLC檢測，KRC衍生化后直接記錄AFT濃度。

二、免疫親和柱＋KRC光化學柱后衍生法

1 簡介

Pribofast AFT總量免疫親和柱可選擇性吸附樣品液中的毒素，從而對毒素樣品起到非常針對性的純化作用，然后用HPLC/FLD＋KRC柱后衍生系統可以有效的測定AFT B1、B2、G1、G2濃度，提高檢測的準確性和靈敏度。

2 免疫親和柱/KRC衍生法特點：

2.1 特異性很強使得樣品凈化效果；

2.2 使用免疫親和柱操作架可以使樣品凈化快速，提高檢測效率高
2.3 HPLC＋FLD+KRC柱后衍生化，有效提高檢測靈敏度，實現較低的檢測限 (AFT B1 0.05ppb)。
2.4 衍生化操作方便，光化學衍生化無需使用衍生試劑（通常電化學柱后衍生均需要使用衍生試劑，分析成本高，操作麻煩，儀器故障率較高）。

2.5 回收率高，達到90％以上

3 免疫親和柱法操作步驟簡介：

3.1 提取樣品：研磨、稱重50g樣品；用甲醇/水（80/20 V/V）混合物將樣品

高速混勻 1 分鐘。
3.2 過濾：將提取的樣品濾膜過 玻璃纖維濾紙，
3.3 將回溫的免疫親和柱安裝在泵流操作架進行過柱凈化：經過Pribofast AFT總量免疫親和柱（IAC-010-3）活化、淋洗、洗脫三步驟，洗脫下來的溶液可直接用于HPLC檢測；

3.4 測定：HPLC直接進樣，經色譜柱、KRC光化學柱后衍生化后直接記錄AFT濃度；

三、酶聯免疫法檢測AFT總量

1 采取直接競爭ELISA方法，利用酶標儀測定樣品和標準品的樣本的吸光值計算得到樣品中AFT總量的含量。

2 試劑盒檢測時間：15分鐘＋15分鐘

3 檢測限：0.1ppb

4 交叉反應率：

關于Pribofast KRC 柱后衍生器和 HPLC參數

●Pribofast KRC 柱后光化學衍生器 波長：254 nm
●HPLC-色譜柱： AFT色譜柱150 x 4.6 mm; C-18
●流動相: 甲醇/水  (45/ 55  v / v)
●流量：1.0 mL/min   柱溫： 30 °C
●進樣體積：20μL
●熒光檢測器：λ-激發波長：365 nm    λ-發射波長：440 nm

●液相色譜儀需要配制：PriboLab公司Pribofast  KRC 柱后光化學衍生器，含有1ml反應池，納米燈管254nm

關于AFT色譜柱：

關于PriboLab & 北京泰樂祺科技有限公司  

作為面向提供霉菌毒素檢測技術解決方案的主要服務商之一，PriboLab憑借強大的研發團隊和霉菌毒素檢測技術的研究，為農業生產、食品加工與糧食、飼料工業等行業提供專業的真菌毒素檢測技術產品與技術服務。北京泰樂祺科技作為 PriboLab在中國的合作伙伴，積極為國內客戶提供的霉菌毒素檢測技術與產品服務，為國內客戶提供適宜的霉菌毒素檢測方案，幫助客戶建立的霉菌毒素項目檢測分析平臺。